别名:Benzonase核酸酶
质量标准
性状: 为无色的澄明液体
活性: ≥200U/µl (另有 :高活力Biolonase核酸酶≥500U/µl)
比活: ≥1.0×106U/mg蛋白
纯度: ≥90% (另有:超纯Biolonase核酸酶≥99%)
蛋白酶:不得检出
菌检: 需氧菌<10CFU/10万U、酵母和霉菌<10CFU/10万U
内毒素(鲎试剂法) : <0.25EU/1000U
酶特性
分子量:30KD(SDS法)
等电点:6.85
使用方法
最适Ph :8.0 (有效工作范围PH 6~10) ,可用50mM TRIS-HCL或PBS的缓冲体系
最适温度:37℃ (有效工作范围0~42℃)
反应时间:(15~37℃)时,反应时间30~60min;
(2~8℃)时,反应时间60min以上。温度越低,反应时间需要越久。
辅助因子:向反应体系加入适量MgCL2或MgSO4,使得Mg2+ 达到 2~10mmol/L,促进酶水解核酸。
用 量:Biolonase核酸酶有效工作浓度为10~100U/ml,首次使用建议50U/ml。
用 法:建议在悬浮菌体时,破菌前加入该酶,尽早加入可降低粘度。
单位定义
一个单位相当于在37℃,30min导致260nm光吸收度增加1.0的酶量,条件为50mM Tris-HCl(pH8.0),含1.0mM MgCl2,100µg/ml牛血清白蛋白,1mg/ml经声波处理的鲑鱼鱼精DNA。 (高氯酸沉淀后测定260nm光吸收)
贮藏条件
温 度: -20±2℃
(本品含20mM Tris-HCl(pH 8.0), 2mM MgCl2,20mM NaCl, 50%甘油的溶液,储存避免低于-20 ℃,因冻结易导致活力丧失)
保质期: 2年